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层析柱的规格

层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。

上样

1、干法上样

、制样：将物料用极性较大的且洗脱剂中需用的溶剂溶解成浆状或溶液状，再加入硅藻土或硅胶充分混合，晾干；再粉碎成粉未状，大孔树脂柱，混合均匀。

、将制好的样品，置于预柱中或层析柱上端硅胶床层的上面，铺平；再放上滤布网，筛板，再按图装好柱上端封头。

2、 湿法上样

、制样：将物料用极性比硅胶小的溶剂例如：、----混合液、、等溶解或制成浆状，直接倒在层析柱硅胶床层的上面，铺平即可如果上样液多，也可以用泵或氮气慢慢打压入柱中。

、同上，放上滤布网筛板，装好上封头。